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猪elisa试剂盒供应

简要描述:

猪elisa试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

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  猪elisa试剂盒操作中的注意事项说明:

  1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

  2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

  3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。

  4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

  5、每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

  6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

  7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。

  8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

  9、在450nm波长处测定各孔的OD值。

  对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心模式测定相当简便,猪elisa试剂盒采用此种测定模式。具体测定方法如下:

  1.首先以双抗体之一于碳酸盐缓冲液中4℃下放置一个晚上包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结合的部分及杂质。

  2.加入含待测物的临床样本如血清等,温育一定时间后洗板;此时,待测抗原就会与固相上特异抗体反应而吸附于固相上。

  3.加入酶标记的双抗体之二,温育一定时间后洗板;此时,在固相上即形成双抗体与特异抗原的夹心产物。

  4.加入酶底物,温育显色测定。

 

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