小鼠elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠G蛋白偶联受体(GPCR)水平。用纯化的小鼠G蛋白偶联受体(GPCR)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入样本及标准品,再与HRP标记的小鼠G蛋白偶联受体(GPCR)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠G蛋白偶联受体(GPCR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠G蛋白偶联受体(GPCR)浓度。
小鼠elisa试剂盒操作中的注意事项:
1、用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2、每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及终止液。测量时先用此孔调OD值至零。
3、为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4、未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5、建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。