小鼠3型呼肠病毒（RE03）ELISA试剂盒

小鼠3型呼肠病毒（RE03）ELISA试剂盒组织样本的处理：

用预冷的PBS (0.01M,pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

关于小鼠3型呼肠病毒（RE03）ELISA试剂盒的固相载体原理：

一、良好的ELISA板应该是吸附机能好，空缺值低。
二、为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣，可应用如下的试验：用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和阴性标本，将它们进行一系列稀释后，在不同的固相载体上按预定的ELISA操纵步骤进行测定，然后比较结果。可作ELISA中载体的材料良多，zui常用的是聚苯乙烯。在ELISA试剂盒中用作固相载体的小珠一般为直径0.6cm的圆珠，表面经磨砂处理后吸附面积大大增加。
三、与聚苯乙烯类似的塑料是聚氯乙烯。人ELISA试剂盒所有单个读数与全部读数的均数之差，应小于10%。其长处是表面积极大，反应在悬液中进行，其速率与液相反应近似。
在哪一种载体上阳性结果与阴性结果差别zui大，这种载体就是这一ELISA测定项目的zui合适的固相载体。小珠的另一特点是更易于使洗涤*，使用特殊的洗涤器，使小珠在洗涤过程中动弹淋洗，其洗涤效果远较板孔的浸泡式为好。ELISA试剂盒常用的检查方法为：以一定浓度的人IgG（一般为10ng/ml）包被ELISA板各孔，洗涤后每孔内加入适当稀释度的酶标抗人IgG抗体，保温后洗涤，加底物显色，终止酶反应后，分别测每孔溶液的吸光度。以含铁的磁性微粒作为ELISA固相载体，反应后用磁铁的吸引进行分离，洗涤利便，试剂盒一般均配以特殊仪器。
四、为便于作少量标本的检测，有制成8联孔条或12联孔条的，放入座架后，大小与尺度ELISA板相同。聚苯乙烯ELISA板因为原料的不同和制作工艺的差别，各种产品的质量差异很大，因此，每一批号的ELISA板在使用前须事先检查其机能。

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