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兔子白介素6elisa试剂盒间接法操作方法:
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃*夜。
2、次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW(超纯水)洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
3、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
4、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
5、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O?D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O?D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
兔子白介素6elisa试剂盒待检样本有体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。供货期是3-5天,以及是盒装液体产品性状和低温运输,用干冰或者冰袋低温运输的运输条件。
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